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产品中心 生物医药用酶 重组肠激酶溶液
920.00 ~ 2,500.00
重组肠激酶溶液
* 本品仅用于科研生产应用,不得用于人体。
9017-74-8

肠激酶(Enterokinase, EK)是一种高度专一性识别 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在Lys的C 端水解多肽。具有高度专一性,水解效率高的特点。可在较宽的pH范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。可除去位于蛋白质 N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。冀百康重组肠激酶采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术,经多级层析纯化,制成的高纯度、高活性重组牛肠激酶,不含其他蛋白酶。

应用

  • 用于融合蛋白的酶切,生物药物生产

优势

  • 无动物源性:无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染,安全性高。

  • 纯度高,比活高。

  • 1000L级别以上生产规模,产品批次之间质量稳定。

  • 合规性:生产设备和生产环境符合相关法规要求,符合GMP指导原则。

  • 质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。

 

 

产品中文名同义词:肠蛋白酶、肠胨酶、肠激活酶、肠肽酶

本品仅供研究使用,不得用于动物或人类的诊断或治疗。

运输及储存稳定性

运输稳定性:冰袋运输,活性稳定。

储存稳定性:-15℃及以下,24 个月稳定,25℃,一周内无活.性损失。缓冲体系:50mM Tris-HCl,pH8.0,250mM NaCl,2mMCa2+,50%甘油。

冻融稳定性:反复冻融 5 次,无活性损失。

推荐使用方法

  • 25℃酶切条件为:25mM Tris-HCl pH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/ml(蛋白总量 50-100μg),重组 EK 0.1~2U,酶切 16~24 小时,用 SDS-PAGE 检测酶切效果。

  • 4℃酶切条件为:可在 4℃对底物进行有效低温酶切,但需要将酶切时间延长至 48~64 小时,或增加 2-3 倍酶量。低温酶切有时候可获得比 25℃更好的酶切效果。

  • 在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果会受影响。可参照以下推荐方法进行酶切:

1) 为获得理想酶切结果,请将样品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中,再进行酶切;

2) 若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在 100mM 以下,NaCl 浓度在 50mM 以下,甘油浓度 5% 以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即 1U 酶切 500μg 蛋白);

3) 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可 达到较好酶切效果。

可对酶切条件进行优化,例如缓冲液 pH,融合蛋白浓度,EK 的量,以及酶切时间,融合蛋白能在稳定条 件下被酶切,用 SDS-PAGE 检测酶切效果。

去除重组肠激酶的办法:可使用胰蛋白酶抑制剂亲和层析去除重组肠激酶。

 

注意:不建议 37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。

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产品参数表

  • 性状

    淡黄色、无色澄明液体

  • 酶活性

    ≥5.0U/μl

  • pH值

    7.0-9.0

  • 纯度

    单一主条带

  • 电泳

    25.8±2.6 kDa

  • 宿主蛋白残留量

    ≤100ng/mg 蛋白

  • 外源性DNA残留

    ≤100ng/mg 蛋白

* 实际参数以产品每批次COA为准;

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