胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)是蛋白酶的一种,EC3.4.21.4。是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。广泛用于各种生物技术过程中,如:蛋白质或多肽的生产;蛋白质的酶解;蛋白质的结构与功能研究;各种组织的细胞分离等。
动物胰蛋白酶
最初胰蛋白酶主要从猪、牛的胰脏中提取,但因其动物源性,存在未知病毒(如非洲猪瘟病毒和疯牛病朊病毒等)和外源因子污染的风险,且常因分离纯化不彻底,存在其它酶类(如糜蛋白酶等,对底物的特异性切割赖氨酸和精氨酸位点产生影响,故此种方法产生的胰蛋白酶在胰岛素等蛋白药物的生产和分析中的应用受到较大的限制。
从动物胰脏中提取胰蛋白酶时,一般是用稀酸溶液将胰腺细胞中含有的酶原提取出来,再沉淀除去大量的酸性杂蛋白以及非蛋白杂质,再分级盐析将胰蛋白酶原等(包括大量糜蛋白酶原和弹性蛋白酶原)沉淀析出。经溶解后,以极少量活性胰蛋白酶激活,使其酶原转变为有活性的胰蛋白酶(糜蛋白酶和弹性蛋白酶同时也被激活),被激活的酶溶液再以盐析分级的方法除去糜蛋白酶及弹性蛋白酶等组分。收集含胰蛋白酶的级分,并用结晶法进一步分离纯化。
重组胰蛋白酶
为了避免已知的动物源污染和未知的污染,重组胰蛋白酶应运而生,通过基因重组技术获得工程菌来表达胰蛋白酶原,可以产生高纯度与高活力的胰蛋白酶,满足蛋白质研究与药物蛋白生产的需要,同时又避免了外源因子污染的风险。
制备重组胰蛋白酶需要培养包含胰蛋白酶原基因的工程菌并诱导胰蛋白酶原基因表达,对得到的包涵体形式的蛋白进行一系列变复性和纯化处理,最终得到具有活性的胰蛋白酶。
重组胰蛋白酶生产过程中不使用动物源成分,因此不会具有动物病毒和外源因子污染的风险。
冀百康重组胰蛋白酶
重组胰蛋白酶(生物化学级)
本品系重组酵母菌表达、经多步分离纯化后冷冻干燥制成,具有天然猪胰蛋白酶相同的活力和特异性。本品生产过程中未使用任何动物源的材料,非常适合代替动物提取的胰蛋白酶。
本品为国家高新技术产品,且已申请国家发明专利CN201811428317.X
重组胰蛋白酶(细胞培养级)
冀百康在重组胰蛋白酶(生物化学级)基础上,改进纯化技术和冻干方法,全新推出细胞培养专用的重组胰蛋白酶,特别适合各种动物细胞的消化。