胰蛋白酶大致可以分为两种，一种是传统使用的动物源性的胰蛋白酶，主要提取自牛或猪的胰腺组织，其缺点是可能会带来病毒污染的风险；另一种则是非动物源性胰酶，即利用基因重组技术生产的重组胰蛋白酶。

胰蛋白酶 ：早期的胰蛋白酶在生物制药的主要应用是胰岛素的生产，不过很快也在其他领域发光发热。动物源的胰蛋白酶具有极大的潜在风险，其自身可能携带大量可感染人的病毒， 例如：疯牛病的牛带有的BSE病毒，猪的口蹄疫病毒，可在人和动物之间传播的禽类的流感病毒等。

重组胰蛋白酶 ：重组胰蛋白酶是一种使用基因工程技术生产的酶。在整个生产流程中，严格避免了使用任何动物源性原材料，解决了传统使用的猪或牛胰蛋白酶可能带来病毒污染的风险，确保了重组胰蛋白酶产品的安全性、高纯度及超高比活等特性。是生物药及科研领域不可缺少的工具酶。

重组热稳定胰蛋白酶

冀百康生物全新推出的重组热稳定胰蛋白酶，是通过毕赤酵母的表达系统，经发酵培养、分离纯化，再经冷冻干燥得到的重组热稳定胰蛋白酶粉末。不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制剂，具有与天然胰蛋白酶相同的活性和特异性。与重组猪胰蛋白酶等不同，该重组热稳定胰蛋白酶不易自切，配制为细胞消化液后可在2-8℃稳定存放30天，可完美规避在使用重组胰蛋白酶过程中反复冻融而造成的损耗。TrypRE select(1×)（重组热稳定胰蛋白酶消化液）更是可在2-8℃条件下可保存24个月。

产品优势：

1、不易自切，稳定性较高；

2、避免反复冻融造成的损耗；

3、对细胞作用温和：细胞毒性小，可保持细胞健康；

4、合规性：生产设备和生产环境符合相关法规要求，符合GMP指导原则。

科普 —— “不易自切”

不易自切是指重组热稳定胰蛋白酶在催化蛋白质水解反应过程中，相较于传统胰蛋白酶，不容易发生自我水解作用，从而避免了自身蛋白分子的快速降解。这种特性使得重组热稳定胰蛋白酶在保持酶活力和稳定性方面具有显著优势，尤其是在长时间储存和反复冻融过程中，能够最大程度地减少酶活性的损失。

与常见酶液对比

重组热稳定胰蛋白酶在细胞培养中的应用

在细胞培养过程中，重组热稳定胰蛋白酶的高比活性能显著提高细胞消化的效率。使用重组热稳定胰蛋白酶对贴壁细胞进行处理，能够快速水解细胞间的沾粘蛋白，释放出单个独立细胞。与此同时，重组热稳定胰蛋白酶不易自切的特性，使得其在细胞消化过程中能更温和地作用，降低对细胞造成的伤害，有效避免外源性病毒和内毒素的污染，从而不会影响细胞传代，保持了高细胞活力和细胞产量。

*细胞传代示意图

（来源：医健速知《细胞传代详细步骤》）

推荐在实际应用中的使用步骤：

1）使用前将TrypRE select(1×)和完全生长培养基预热至37℃。随后，吸出并丢弃用过的培养基；

2）用5ml不含Ca2+和Mg2+的DPBS缓冲液清洗细胞，随后吸出并丢弃；

3）加入适量体积TrypRE select(1×)到培养瓶，确保TrypRE select(1×)完全覆盖细胞；

4）在37℃下孵育，直至细胞脱落。使用倒置显微镜观察细胞，以确保细胞从培养瓶表面完全脱落；

5）加入5-10ml预热的完全培养基到培养瓶，倾斜培养瓶直到彻底冲洗培养瓶，将细胞悬液转移至15ml锥形管中，100×g离心5-10min；

6）丢弃上清液，并用2-5ml预热的完全培养基重悬细胞沉淀；

7）根据您的细胞类型，根据正常方案接种、孵育和继代培养。

重组热稳定胰蛋白酶有许多潜在用途，包括用于生物药物生产，如胰岛素等。重组热稳定胰蛋白酶解决了传统使用的猪或牛胰蛋白酶可能带来病毒污染的风险是生物药及科研领域是不可缺少的工具酶。

产品参数

订购规格

珠海冀百康生物科技有限公司成立于2015年，拥有前沿的合成生物学创新技术，专注于“高活性生物原料”与“高端生物制药”两大核心领域。产品主要应用在抗体、疫苗、蛋白类、核酸类药物的生产以及细胞培养、人造肉、功效护肤和医美领域。冀百康生物拥有4000多㎡符合国际GMP标准的生产车间， 超2吨的生物发酵罐；行业的竞争力主要体现在：研发创新能力强，客户服务系统完善，给品牌客户提供完整的解决方案及CDMO/ODM服务。

参考文献：

1、知网 [1]杨霁菡.胰蛋白酶自切规律的解析及抗自切改造[D].天津科技大学,2016.DOI:10.27359/d.cnki.gtqgu.2016.000036

2、来源：冷春生, 崔航, 李淑楠 . 重组酶在胰岛素生产中的应用[J]. 中国药学(英文版), 2014, 23(5): 335-337.