细胞快速消化的选型指南

2023/09/22

酶 (enzyme)，是由活细胞合成、在机体内行使催化功能的生物催化剂。目前已发现的酶约有万余种。日常实验中，在贴壁细胞传代前需要把细胞用消化试剂从培养容器表面解离出来，细胞得以分离成单个悬液传代至含新鲜培养基的新容器内。细胞消化的好，后续实验就会进行的更加顺利；反之，则既浪费了时间又出不了成果。在细胞消化的方法中，酶消化法是最常用的方法，使用合适的消化酶则是细胞消化的关键步骤，我们整理了一份细胞消化类产品选择指南，方便您更好的选择适合自己实验的产品。

常见用于细胞消化和酶切的类别

重组胰蛋白酶

重组胰蛋白酶是一种使用基因工程技术生产的酶。现代生物制药的生产过程中，使用含有动物源的原料，可能会将引起人畜共患病的潜在病毒源带入产品中，如疯牛病的BSE、口蹄疫病毒等，为了减少污染源，通过基因工程技术合成胰蛋白酶，解决了传统使用的猪或牛胰蛋白酶可能带来病毒污染的风险。重组胰蛋白酶多用重组大肠杆菌或酵母系统重组表达并经过多步层析纯化获得，重组胰蛋白酶与天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性，其氨基酸序列与猪源胰蛋白酶序列同源，能特异性切割多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基。因其无动物源污染性，在医药开发、生化研究领域中有着广泛的应用。

产品优势

● 不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制剂；

● 符合中国药典2020版的标准；

● 精细化的过程控制，成就了重组胰蛋白酶的极高纯度；

● 高比例β构型，以及超高比活性(≥3800USP units/mg pro.)；

● 重组胰蛋白酶冻干粉在40℃可存放10天以上；

● 在2~8℃时可存放6个月以上，-15~-20℃时可存放24个月；

重组赖氨酰内切酶

（双专利加持原料）

重组赖氨酰内切酶属于生物化学级别的基因工程酶，不含有其他杂蛋白酶（如Lys-N、Arg-C等丝氨酸类蛋白酶），不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制剂。选用Achromobacter lyticus基因，克服大肠杆菌表达难题，选育高活性菌株，经高密度发酵、分离纯化和冷冻干燥而制成的冻干粉，可特异性切割赖氨酸残基羧基端的肽键，具有天然赖氨酰内切酶相同的特异性和活力，且分为生化级和质谱级两种。

产品优势

● 纯化全过程在温和环境中完成，防止酶活损失；

● SDS-PAGE电泳，单一主条带；

● 酶的比活性≥3.0AU/mg pro.；

● 酶切效率高，2AU酶即可完全酶切1g大多数融合蛋白；

其他工具酶

重组肠激酶（Enterokinase, light chain）是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽，具有高度专一性，水解效率高的特点，其活性可达11.5U /μl 。

重组Kex2蛋白酶属于（E.C.3.4.21.61）属于枯草杆菌蛋白酶家族，为酵母自身编码的一种前体加工酶，Ca2+ 依赖型丝氨酸蛋白酶，能够专一性地识别和切割 Lys-Arg，Arg-Arg，Pro-Arg 等双碱性氨基酸的羧基端肽键，不同于Trypsin，该酶不能识别和切割单一碱性氨基酸即 Arg或 Lys 的羧基端肽键。

二者皆采用重组毕赤酵母高效达技术，分离纯化得到，是具有高纯度、高活性特点。

产品优势

● 快速有效且温和的细胞消化酶，对细胞损伤小，且能维持细胞膜完整性；

● 来源于酵母表达，无支原体或其他动物病毒污染；

● 稳定性强，不受温度、pH及血清组分的影响；

● 可用于多种类型组织和细胞的分离等。

使用说明

*注：两个货号代表不同级别，具体请联系业务人员。

产品列表

*具体参数以每批次COA文件为准