- 产品简介

      肠激酶（Enterokinase, EK）是一种高度专一性识别 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在 Lys 的 C 端水解多肽。具有高度专一性，水解效率高的特点。可在较宽的 pH 范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割 融合蛋白。可除去位于蛋白质 N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。 冀百康重组肠激酶采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术，经多级层析纯化，制成的高纯度、高活.性重组牛 肠激酶，不含其他蛋白酶。

   - 产品优势

☑ 无动物源性：无动物病.毒、无致病物质、无外源因子污染，安.全性高。 

☑ 纯度高，比活高。 

☑ 生产规模 1000L 以上。 

☑ 合规性：生产设备和生产环境符合相关法规要求，符合 GMP 指导原则。 

☑ 质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。

- 产品特性

酶活定义：在 25℃，12~16 小时内，将 0.5mg 保存于 25mM Tris-HCI pH 8.0 

缓冲液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量为 1U。

- 使用方法

【25℃酶切条件为】25mM Tris-HCl PH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/ml（蛋白总量 50-100μg），重组 EK 0.1~0.2U,酶切 16~24 小时，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。 

【4℃酶切条件为】可在 4℃对底物进行有效低温酶切，但需要将酶切时间延长至 48~64 小时，或增加 2-3 倍酶量。低温酶切有时候可获得比 25℃更好的酶切效果。  在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切： 1） 为获得理想酶切结果，请将样品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中，再进行酶切； 2） 若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在 100mM 以下，NaCl 浓度在 50mM 以下，甘油浓度小于 5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即 1U 酶切 500μg 蛋白）； 3） 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可 达到较好酶切效果。 

可对酶切条件进行优化，例如缓冲液 pH，融合蛋白浓度，EK 的量，以及酶切时间，融合蛋白能在稳定条 件下被酶切，用 SDS-PAGE 检测酶切效果。 

去除重组肠激酶的办法：可使用胰蛋白酶抑.制.剂亲和层析去除重组肠激酶。 注意：不建议 37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。

- 运输及稳定性

运输稳定性：冰袋运输，活.性稳定。

储存稳定性：-15℃及以下，24 个月稳定，25℃，一周内无活.性损失。缓冲体系：50mM Tris-HCl，pH8.0，
250mM NaCl，2mMCa2+，50%甘油。

冻融稳定性：反复冻融 5 次，无活.性损失。

本品仅供研究使用，不得用于动物或人类的诊断或治辽。

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