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重组赖氨酰内切酶(质谱级)
日期:2018-08-08    浏览次数:

重组赖氨酰内切酶(质谱级)


产品简介

赖氨酰内切酶(Lysyl Edopeptidase)又称赖氨酰肽链内切酶Lys-C 内切酶,是一种丝氨酸蛋白酶, 蕞.初由Masaki等人从土壤细.菌中发现并分离得到。该酶具有高度特异性,可特异性切割赖氨酸残基和 S-氨乙 基半胱氨酸残基羧基端的肽键。也有报道称具有微量的非特异性切割。该酶是蛋白质序列分析和生物制品生产 中非常珍贵的工具酶。该酶可单独使用,也可以与其它蛋白酶一起使用,经过消化的蛋白可用于肽图谱分析以 及目的蛋白的制备。 本品是从重组大肠杆菌中分离纯化,再经冷冻干燥得到的重组赖氨酰内切酶粉末。

本品属于生物化学级别 的基.因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑.制.剂,具有天.然赖氨酰内切酶相同的活.力和特异性。



产品优势

☑ 无动物源性:无动物病.毒、无致病物质、无外源因子污染,安.全性高。 

☑ 纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。 

☑ 生产规模 1000L 以上。 

☑ 合规性:生产设备和生产环境符合相关法规要求,符合 GMP 指导原则。 

☑ 质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。



- 产品特性


性状

白色或类白色冻 干粉

等电点

6.9-7.0

分子量为 29.2 kD±2.9kD 的单一主带(SDS-PAGE)

蕞佳pH 8.5-9.5

溶解性

在缓冲液中可溶

比活.性 不得少于 1.0 AU/mg pro. 

酶活定义:30℃, pH9.5 条件下,每分钟催化底物生成 1μmol 对硝基苯胺的酶量为 1AU。




产品用途

• 酶抑.制.剂:本品不含 DFP,PMSF,TLCK 等酶抑.制.剂。


- 反应规程

【蛋白质的准备 】

将蛋白质溶解在 25mM Tris-HCl,pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要变性处理的蛋白质可以用蕞.小体积的 变性剂,如 8M 尿素或 6M 盐.酸胍,在室温~37℃条件下孵育 1h 使之溶解。需要做二硫键还原处理的蛋白质 可以加入终浓度为 5mM 的 DTT 或β-巯基乙.醇,于 50~60℃孵育 20 分钟使之溶解。调整反应溶液体积使 Tris-HCl 为 25mM,尿素为 1M 或更低,盐.酸胍为 0.1M 或更低。 

【酶液准备 】

称取所需的酶粉,用适量缓冲液溶解即得。 

【消化反应 】

1g 多肽或蛋白质推荐酶的用量在 1~100AU 之间。推荐于-25~37℃反应 2~18h。 

如果需要终止反应,可以加入乙酸或盐.酸调节 pH 至酸性。 

【注意】 为了获得蕞.佳的酶切效果,通常需要蛋白处于可溶、变性和二硫键还原的状态,否则需要加大酶用量。应严格控制盐.酸胍和尿素的加入量,尿素高于 1M 或盐.酸胍高于 0.1M 将会降低重组赖氨酰内切酶得活.力。


- 运输和储存稳定性

运输稳定性:冰袋保温运输,活.性稳定。 

储存稳定性:冻 干粉在-15~-20℃条件下至少能稳定存放24个月。1mM盐.酸或50mM醋酸溶解后储存于-15~-20℃,反复冻融10次,无活.性损失。溶解后 2~8℃保存建议不超过7天 ,溶解后-15~-20℃ 保存建议不超过30天 。


- 注意事项和免责声明

 温度超过 37℃本品可能发生自我消化。在 2M 尿素或 0.1%SDS可保留大部分活.力。

 本品具有吸潮性,应室温平衡后再取用。

 本品不得用于临床诊断和治.疗。


说明:由于广告法的缘故,部分违禁词用同音字替换或使用符号来间隔,如有疑问可以联系我们提供详细的产品信息。